Dinámica de la evolución de las formas de Blastocystis spp. en un medio de cultivo simple / Dynamics of the evolution of the forms of Blastocystis spp. in a simple culture medium

Resumen Blastocystis spp. es un parásito muy frecuente en materia fecal humana, pero la naturaleza polimórfica y el número de Blastocystis en la muestra pueden complicar su detección por microscopía. El objetivo del trabajo fue describir la dinámica de los morfotipos de Blastocystis a corto plazo en un medio de cultivo simple y determinar su aplicabilidad para utilizarlo como complemento del análisis coproparasitológico y para estudios morfológicos, bioquímicos y moleculares del parásito. Se sembraron 10 muestras de materia fecal con Blastocystis en un medio Pavlova adaptado, se examinaron diariamente por examen microscópico durante 6 días y se registraron las formas y el recuento. El desarrollo fue regular y abundante y las formas fueron de tamaños variables y claramente identificables. El cultivo ensayado puede ser útil para la detección de Blastocystis cuando existan dudas diagnósticas por microscopía, para estudios de sensibilidad y especificidad diagnóstica o cuando se requiera aumentar la carga para realizar otros estudios.

Abstract Blastocystis spp. is a very frequent parasite in human fecal matter, but the polymorphic nature and the number of Blastocystis in a sample can complicate its detection by microscopy. The objective of the present work was to describe the dynamics of Blastocystis morphotypes in the short term in a simple culture medium and to determine its applicability to use it as a complement to coproparasitological analysis and for morphological, biochemical and molecular studies of the parasite. Ten stool samples with Blastocystis were cultured in an adapted Pavlova medium and examined during 6 days by microscopy to record the forms and the count. The development was regular and abundant and the shapes were of variable sizes and clearly identifiable. The tested culture could be used for the detection of Blastocystis when microscopic diagnosis is dubious, for studies of diagnostic sensitivity and specificity or when it is necessary to increase the load to perform other studies.

Resumo Blastocystis spp. é um parasita muito frequente nas fezes humanas, mas a natureza polimórfica e o número de Blastocystis na amostra podem complicar a sua detecção através do microscópio. O objetivo do trabalho foi descrever a dinâmica dos morfotipos de Blastocystis no curto prazo em um meio de cultura simples e determinar sua aplicabilidade para ser utilizado como complemento da análise coproparasitológica e para estudos morfológicos, bioquímicos e moleculares do parasita. Foram semeadas dez amostras de fezes com Blastocystis em um meio Pavlova adaptado e examinadas diariamente através de exame microscópico durante 6 dias, registrando as formas e fazendo recontagem. O desenvolvimento foi regular e abundante e as formas foram de tamanhos variáveis e claramente identificáveis. A cultura testada pode ser útil para a detecção de Blastocystis quando houver dúvidas diagnósticas por microscopia; para estudos de sensibilidade e especificidade diagnóstica ou quando for necessário aumentar a carga para a realização de outros estudos.

Gastrointestinal parasites of Leontopithecus chrysomelas in the Atlantic Forest, Brazil / Parasitas gastrintestinais de Leontopithecus chrysomelas na Floresta Atlântica, Brasil

Abstract We performed coproparasitological testing of free-living golden-headed lion tamarins, Leontopithecus chrysomelas, using the Hoffmann-Pons-Janner method. In total, we collected 118 samples from ten groups: four living in Federal Protected Area and six living in Non-Protected Areas of cocoa farms. Eggs from parasites of the Acanthocephala phylum and Spiruridae, Ancylostomatidae, Ascarididae and Oxyuridae families were identified, as well as the genus Strongyloides (Nematode: Strongyloididae) and phylum Apicomplexa. This is the first description of infection with coccidian, Trichuridae family and Strongyloides spp. in L. chrysomelas. A total of 48% (n= 57) of the animals were infected and the highest prevalence (37.2±SD 8.72, n = 44) was for Acanthocephalidae, followed by Spiruridae (8.5±SD 5.03, n = 10). There was no difference in parasite prevalence by age classes or sex. However, we found higher diversity and prevalence of parasites in animals living in the Federal Protected Area. These results suggest that intestinal parasites may be influenced by environmental factors, such as the management of the areas where the animals live, in addition to the feeding behavior of L. chrysomelas and distinct transmission strategies of parasites. The combination of ecological and demographic data combined with parasitological studies may contribute to conservation programs for this species.

Resumo Foram realizados testes coproparasitológicos de micos-leões-dourados de vida livre, Leontopithecus chrysomelas, usando-se o método de Hoffmann-Pons-Janner. No total, foram coletadas 118 amostras de dez grupos: quatro grupos residentes em Área de Conservação Federal e seis grupos em Área não protegida de fazendas de cacau. Ovos de parasitas do filo Acantocephala e das famílias Spiruridae, Ancylostomatidae, Ascarididae, Oxyuridae foram identificados, bem como o gênero Strongyloides (Nematoda: Strongyloididae) e o filo Apicomplexa. Esta é a primeira descrição de infecção de coccídeos, família Trichuridae e Strongyloides spp. em L. chrysomelas. Um total de 48% (n = 57) dos animais estavam parasitados e a maior prevalência (37,2 ±DP 8,72, n = 44) foi para Acanthocephalan, seguido por Spiruridae (8,5±DP 5,03, n = 10). Não houve diferença na prevalência do táxon de parasita por idade ou sexo. No entanto, foi encontrada maior diversidade e prevalência de parasitas em animais que vivem na Unidade de Conservação Federal. Esses resultados sugerem que os parasitas intestinais podem ser influenciados por fatores ambientais, como o manejo das áreas, além do comportamento alimentar de L. chrysomelas e distintas estratégias de transmissão dos parasitas. A combinação de dados ecológicos e demográficos com estudos parasitológicos podem contribuir para programas de conservação dessa espécie.

Frequency of parasitic forms in fecal samples of maned wolf in different seasons of the year at the Serra da Canastra National Park, Minas Gerais State, Brazil / [Frequência de formas parasitárias em massas fecais de lobos-guarás em diferentes estações do ano no Parque Nacional da Serra da Canastra, MG]

O Parque Nacional da Serra da Canastra (PNSC), localizado no estado de Minas Gerais, é um importante habitat de inúmeras espécies de animais ameaçados de extinção, como o lobo-guará (Chrysocyon brachyurus). Parasitos de animais selvagens podem representar um problema para os programas de manejo e recuperação de espécies ameaçadas, pois atuam como causa primária ou agravante de inúmeras doenças. Dependendo da época do ano, a suscetibilidade ao parasitismo pode ser maior devido à facilidade de infecção. Com o objetivo de avaliar a frequência de endoparasitos e a sazonalidade dessas parasitoses em diferentes épocas do ano, foram examinadas 103 amostras fecais de lobos-guarás, coletadas no PNSC, durante o período de março de 2017 a agosto de 2019. O número de amostras positivas para pelo menos uma espécie de parasito foi de 47 amostras (45,63%), sendo o outono a estação em que foi encontrada a maior frequência de formas parasitárias, com 60,86% (14/23) de amostras positivas, seguido do inverno, com 52,38% (11/21), verão com 37,5% (15/40), e primavera com 36,84% (7/19). Dentre os parasitos encontrados, Capillaria sp. apresentou a maior frequência, sendo encontrado em 23 amostras (22,33%), seguido de trematódeos, em 15 amostras (14,56%), acantocéfalos, ascarídeos, Trichuris sp. e Ancylostoma sp., em cinco amostras (4,85%), nematoides da superfamília Strongyloidea, Lynxacarus sp., em duas amostras (1,94%), e pentastomídeos em uma amostra (0,97%).(AU)

Blastocystis: estudio coproparasitológico, clínico-epidemiológico y de prevalencia de subtipo 3 en pacientes de hospitales de Bahía Blanca, Argentina / Blastocystis: coproparasitological, clinical-epidemiological and prevalence study of subtype 3 in patients from hospitals in Bahía Blanca, Argentina

Resumen Blastocystis es el parásito unicelular del intestino del hombre y de otros animales más prevalente en seres humanos. Presenta gran variedad genética con múltiples subtipos (ST). Aunque se ha asociado a desórdenes intestinales y extraintestinales, su patogenicidad es discutida. Se analizaron 461 muestras de materia fecal de pacientes sintomáticos (n=380) y asintomáticos (n=81) de hospitales de Bahía Blanca, Argentina; se solicitó consentimiento informado y se completó una ficha epidemiológica. Se realizaron análisis coproparasitológicos, morfometría, recuento y tipificación de Blastocystis ST3 por PCR. La población fue: 57,3% de sexo femenino y 42,7% masculino. La prevalencia de Blastocystis fue de 31% y de Blastocystis ST3 62%. Se hallaron formas vacuolares, granulares y quísticas; las vacuolares fueron las más frecuentes. En el 64,8% de las muestras los Blastocystis fueron pequeños y escasos. El 88,4% de los pacientes sintomáticos presentó trastornos gastrointestinales, el 4% urticaria y el 7,6% fiebre, anemia y bajo peso. El 66,7% de los pacientes con urticaria presentó Blastocystis. La presencia de síntomas se asoció significativamente con Blastocystis (p<0,002). No se hallaron asociaciones estadísticas entre Blastocystis, la edad, el sexo, la disponibilidad de agua potable, de cloacas y el contacto con animales. Dentro de los síntomas sólo se encontró asociación estadística de Blastocystis con urticaria (p<0,007). No hubo asociación entre Blastocystis ST3 y sintomatología. Los resultados destacan la alta prevalencia de Blastocystis y de Blastocystis ST3, la necesidad de hacer un coproparasitológico minucioso, su asociación estadística con urticaria y la importancia de no ignorarlo en el proceso salud-enfermedad.

Abstract Blastocystis is the unicellular parasite of the intestine of man and other animals,most prevalent in humans. It has a great genetic variety with multiple subtypes (ST). Although it has been associated with intestinal and extraintestinal disorders, its pathogenicity remains unclear. Four hundred and sixty one stool samples from symptomatic (n=380) and asymptomatic(n=81) patients from hospitals in Bahía Blanca, Argentina were analysed; informed consent was requested and an epidemiological file was completed. Coproparasitological analysis, morphometry, counting and typing of Blastocystis ST3 were performed by PCR. The population was: 57.3% female and 42.7% male.The prevalence of Blastocystis was 31.0% and that of Blastocystis ST3 62%. Vacuolar, granular and cystic forms were found, with vacuolar forms being the most frequent. Blastocystis were small and scarce in 64.8% of the samples. Most of the symptomatic patients (88.4%) presented gastrointestinal disorders, urticaria 4% and fever, anemia and low weight 7.6%; 66.7% of the urticaria patients presented Blastocystis. The presence of symptoms was significantly associated with Blastocystis (p<0.002). No statistical associations were found between Blastocystis, age, sex, availability of drinking water, sewage, and contact with animals. Within the symptoms, only statistical association of Blastocystis with urticaria was found (p<0.007). There was no association between Blastocystis ST3 and symptomatology. The results highlight the high prevalenceof Blastocystis and Blastocystis ST3, the need for a thorough coproparasitology, their statistical association with urticaria and the importance of not ignoring it in the health-disease process.

Resumo Blastocystis é o parasita unicelular do intestino do homem e outros animais, mais prevalente em seres humanos. Apresenta grande variedade genética com múltiplos subtipos (ST). Embora tenha sido associada a distúrbios intestinais e extraintestinais, sua patogenicidade é debatida. Foram analisadas 461 amostras de fezes de pacientes sintomáticos (n=380) e assintomáticos (n= 81) de hospitais de Bahía Blanca, Argentina; foi solicitado consentimento informado e preenchida uma ficha epidemiológica. Foram realizadas análises coproparasitológicas, morfometria, contagem e tipificação de Blastocystis ST3 por PCR. A população era: 57,3% sexo feminino e 42,7% masculino. A prevalência de Blastocystis foi de 31,0% e de Blastocystis ST3 62%. Foram encontradas formas vacuolares, granulares e císticas, sendo as vacuolares as mais frequentes. Em 64,8% das amostras, os Blastocystis foram pequenos e escassos; 88,4% dos pacientes sintomáticos apresentaram distúrbios gastrointestinais, 4% urticária e 7,6% febre, anemia e baixo peso; 66,7% dos pacientes com urticária apresentaram Blastocystis. A presença de sintomas foi associada significativamente com Blastocystis (p˂0,002). Não foram encontradas associações estatísticas entre Blastocystis, a idade, sexo, a disponibilidade de água potável, de esgoto e o contato com animais. Dentro dos sintomas, só foi encontrada associação estatística de Blastocystis com urticária (p˂0,007). Não houve associação entre Blastocystis ST3 e sintomatologia. Os resultados destacam a alta prevalência de Blastocystis e Blastocystis ST3, a necessidade de fazer um coproparasitologico minucioso, sua associação estatística com urticária e a importância de não ignorá-lo no processo saúde-doença.

Endoparasites in fecal samples from anatids in captivity in São Paulo, Brazil / Endoparasitos em amostras fecais de anatídeos em cativeiro em São Paulo, Brasil

Abstract The objective of the present study was to identify the intestinal parasites with the highest prevalence in anatids that were reared extensively in the city of São Paulo, through coproparasitological examinations. Fecal samples (n=108) were collected at two times, with an interval of two months between them, during the year 2018. The samples were constituted from a pool of feces, and one sample was collected from each enclosure. The samples were identified as belonging to 13 species of anatids (Aix galericulata, Aix sponsa, Anser abyssinia, Chenonetta jubata, Chloephaga melanoptera, Chloephaga picta, Lophodytes cucullatus, Tadorna cana, Tadorna ferrugínea, Tadorna radjah, Tadorna tadorna, Tadorna tadornoide and Tadorna variegata). Samples of birds with or without clinical symptoms of endoparasitosis were then collected. The Coproplus® test was used to make the coproparasitological diagnosis and subsequently the material was examined individually, at Santo Amaro University in São Paulo. It was observed that 48.14% of the enclosures had birds infected by one or more endoparasites. Parasites of the order Coccidia presented the highest prevalence (22.22%), followed by those of the orders Trichuroidea (10.18%) and Ascaridia (4.63%). Moreover, Balantidium sp. was found, the cycle and relevance of these ciliates in birds is uncertain.

Resumo O objetivo do presente estudo foi identificar os parasitos intestinais de maior prevalência em anatídeos provenientes de uma criação extensiva no município de São Paulo, por meio da realização de exame coproparasitológico. Foram coletadas 108 amostras fecais em dois momentos, com intervalo de dois meses entre eles, durante o ano de 2018. As amostras foram constituídas de um pool de fezes, e coletada uma amostra para cada recinto por coleta. Foi realizada a identificação das espécies e estas pertenciam a 13 espécies de anatídeos (Aix galericulata, Aix sponsa, Anser abyssinia, Chenonetta jubata, Chloephaga melanoptera, Chloephaga picta, Lophodytes cucullatus, Tadorna cana, Tadorna ferrugínea, Tadorna radjah, Tadorna tadorna, Tadorna tadornoide e Tadorna variegata). Em seguida foram coletadas as amostras de aves com sintomatologia clínica ou não de endoparasitoses. Para o diagnóstico coproparasitológico e coleta foi utilizado o teste Coproplus® e posteriormente, o material foi examinado individualmente na Universidade Santo Amaro. Observou-se que 48,14% dos recintos possuíam animais infectados por um ou mais endoparasitos. Houve maior prevalência para parasitos da ordem Coccidia (22,22%), seguido pela ordem Trichuroidea (10,18%) e Ascaridia (4,63%) e como achado o Balantidium sp. que possui ciclo e relevância incerta em aves.

Willis method modification with a view to improving routine coproparasitological diagnosis

Intestinal parasites still cause high morbidity and mortality, due to poor hygiene and sanitary conditions, and therefore indiscriminate treatment has been routine practice advocated by the Public Health staff. Although there is a consensus regarding the need to diagnose such diseases, this is not performed with the necessary care, due to great demand and the lack of a wide ranged and highly sensitive technique. In this sense, most clinical laboratories use routine methods for fecal examination such as the Lutz sedimentation or modified Ritchie methods, which are complete and easy to execute, but do not have adequate sensitivity to detect low density eggs and protozoan cysts, especially when there is a predominance of low parasite burdens. In contrast, there are methods that are based on the flotation of low density developmental forms, namely, the Willis method (NaCl flotation d=1.120), which is rapid, easy to perform and allows high density egg flotation but with low sensitivity for protozoan cysts; and the Faust method, which is based on centrifugal flotation of developmental forms in a 33% ZnSO4 (d=1.200) solution, but with the disadvantage of being lengthy and requiring a centrifuge. In this study, we verified the applicability of introducing an alteration in the Willis method, which consisted in the substitution of NaCl by ZnSO4 in order to combine the advantages of this method with the Faust method. 208 samples were assessed by the Willis and Ritchie methods and by the proposed method (modified Willis). The latter proved superior to the other two (ρ <0,0001 ­ X2) regarding the detection of protozoan cysts, but similar to the Ritchie method in regard to other diagnosed parasites, therefore demonstrating the high potential for the introduction of this modified method in the routine of fecal diagnosis

Association between clinical indications and coproparasitological tests carried out at the Pedro Ernesto University Hospital (HUPE/UERJ) in Rio de Janeiro, Brazil

Enteroparasitosis is a public health problem in Brazil. Clinical indications and the appropriate stool examination are essential to obtain an adequate result. This study aims to evaluate whether the clinical indications and the choice of coproparasitological tests requested by the medical services may influence the diagnosis of enteroparasitosis. The data was obtained from the records in the Laboratory of Parasitology at the Pedro Ernesto University Hospital (HUPE/ UERJ) of the State University of Rio de Janeiro (UERJ) from 2009 to 2014. The qualitative variables were grouped in medical services (medical surgery, infectious and parasitic diseases, gastroenterology, pediatrics and rheumatology); types of tests requested (parasitological stool examination (PSE), merthiolate-iodine-formaldehyde (MIF), and sodium-acetate acetic acidformaldehyde (SAF)) and clinical indications (anemia, diarrhea, abdominal pain, eosinophilia, routine tests, HTLV patients, HIV patients, parasitosis and transplantation research). The chi square (X²) and the Spearman coefficient correlation tests were performed to calculate the association between the clinical indications and the coproparasitological tests. A significant association was evident in the clinical indication: parasitosis found among the MIF tests and Trichrome Wheatley (ρ = 0.980). In other clinical indications such as anemia, surgery/ transplant, diarrhea, patients with HIV, HTLV and eosinophilia (despite the PSE tests and MIF having presented a strong link (ρ = 0.802), there was no significant association among the tests. Clinical indications are essential and they have a great influence on the parasitological diagnosis, requiring a combination of diagnostic methods for the detection of protozoa and helminths of medical interest.

Drug-induced panniculitis due to deworming in a dog ­ case report / Paniculite farmacodérmica decorrente de vermifugação em um cão - relato de caso

Outpatient clinics, clinics, and veterinary hospitals in the state of São Paulo and other Brazilian states commonly prescribe broad-spectrum vermicidal agents. The prescriptions are not based on coproparasitological examination results and drugs, including those used for the elimination of enteric parasites, are not innocuous and can potentially cause health hazards. Therefore, we report a clinical case of drug-induced panniculitis caused by deworming and show the actual occurrence of endoparasites in canine and feline outpatients at HOVET-USP.(AU)

É prática corrente em ambulatórios, consultórios, clínicas e hospitais veterinários paulistas, por não dizer brasileiros, a prescrição de ativos com ação vermicida, no senso lato, sem o embasamento do, hoje até prosaico, exame coproparasitológico. É sabido há muito que todo e qualquer fármaco não é inócuo e pode potencialmente acarretar agravos à saúde, e dentre estes incluem-se os ativos destinados à erradicação de parasitos entéricos. Decidiu-se assim por se relatar um caso clínico de paniculite farmacodérmica decorrente de vermifugação, bem como situar a real ocorrência de endoparasitas em pacientes, caninos e felinos, trazidos para atendimento ambulatorial no HOVET-USP.(AU)

Evidences for clustering of schistosoma mansoni eggs in the sediment produced by helmintex

O diagnóstico da esquistossomose em áreas de baixa intensidade de transmissão exige o aprimoramento dos métodos para superar a pouca sensibilidade dos métodos coproparasitológicos clássicos. Helmintex é um método novo, baseadona interação dos ovos de Schistosoma mansoni com partículas paramagnéticas em um campo magnético. Um estudo preliminar de semeadura confirmou a impressão obtida durante exames de rotina com Helmintex, de que os ovos são geralmente encontrados na metade inferior e não na metade superior da coluna de sedimento sob exame. Nove réplicas de 100 ovos foram semeados em fezes não infectadas e cada réplica foi submetida ao Helmintex. Alíquotas de 40 (Miu)L foram retiradas do topo e sequencialmente examinadas ao microscópio óptico, para contagem dos ovos. Em 6 replicas, a maioria dos ovos foram encontrados na metade inferior. Estes achados interessantes podem levar ao aprimoramento da etapa final de isolamento dos ovos e maior sensibilidade no diagnóstico coproscópico da esquistossomose.

Prevalência de enteroparasitoses na população do município de Maria Helena, Paraná / Prevalence of enteroparasitosis in the population of Maria Helena, Paraná State

O estudo epidemiológico dos parasitas intestinais tem por objetivo determinar as principais doenças e seus respectivos agentes etiológicos que se encontram distribuídos por todo o mundo, de forma endêmica ou epidêmica. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a prevalência de infecção por enteroparasitoses, em qual idade há sua maior prevalência, relacionando a infecção com a idade, o sexo e a região em que a pessoa vive, no município de Maria Helen (PR). A coleta de dados foi realizada de junho de 2004 a maio de 2006. Foram analisadas 431 amostras de fezes pelo método de sedimentação espontânea e centrífugo-flutuação. A prevalência de enteroparasitoses foi de 16 por cento, sendo os enteroparasitas mais frequentes: Endolimax nana (6,5 por cento), Entamoeba coli (3,5 por cento), Giardia intestinalis (6,3 por cento), Ascaris lumbricoides (1,4 por cento), Strongyloides stercoralis (0,7 por cento), Entrobius vermicularis (0,7 por cento), Ancilostomídeo (0,2 por cento), Entamoeba hystolitica e Taenia sp (0,2 por cento). O poliparasitismo foi detectado em 3,2 por cento das amostras. A faixa etária que apresentou maior prevalência foi de zero a nove anos, porém não houve diferença estatística entre os fatores analisados, uma vez que p>0,05. Diante desses resultados, conclui-se que o município apresenta características similares em relação à zona rural e urbana.

The epidemiological study on intestinal parasites has the purpose of determining the main diseases and their respective etiologic agents, which are endemically or epidemically spread worldwide. The aim of this study was to evaluate the enteroparasitosis infection prevalence, in which age group they prevail, relating the infection with age, gender, and the region in which the person lives, in the city of Maria Helena - PR. Data collection was performed from June of 2004 to May of 2006. 431 samples of feces were analyzed through the spontaneous sedimentation and centrifugal fluctuation methods. The enteroparasitosis prevalence was of 16 percent, being the most frequent enteroparasitosis: Endolimax nana (6.5 percent), Entamoeba coli (3.5 percent), Giardia lamblia (6.3 percent), Ascaris lumbricoides (1.4 percent), Strongyloides stercoralis (0.7 percent), Entrobius vermicularis (0.7 percent), Anchylostomiasis (0.2 percent), Entamoeba hystolitica and Taenia sp (0.2 percent). Poly-parasitism was found in 3.2 percent of the samples. The age group from 0 to 9 years presented the highest prevalence, however there was no statistical difference among the analyzed factors since p>0.05. From these results, it was possible to conclude that the city presents similar characteristics both in rural and urban zones.

Estudo comparativo entre técnicas coproparasitológicas para diagnóstico de Fasciola hepática em bovinos / Comparative study among coproparasitologic technics for the diagnosis of Fasciola hepatica in cattle

A comparação entre três técnicas coproparasitológicas para o diagnóstico de ovos de Fasciola hepática em fezes de bovinos, testadas para o mesmo grupo de animais, demonstrou convergência de resultados nos 1439 de 37 propriedades rurais. As pequenas diferenças observadas foram estatisticamente não significativas. O estudo concluiu que as três técnicas podem ser utilizadas como rotina para o diagnóstico da fasciolose, mas sugere que em condições de campo, a técnica de Girão ou dos quatro tamises seja a indicada.

The comparison of the three coproparasitological technics for diagnosis of Fasciola hepatica eggs in cattle faeces, performed at the same groups of animais, gave highly convergent results in 1439 bovines from 67 farms. In weak difference the results were no discordant significant. The study concluded that the three technics can be used in routine procedure for the diagnosis of F. hepatica, but allow to suggest that in field situation, the Girão's technics must be indicated and used.